流式細胞儀
產(chǎn)品名稱
流式細胞儀
管理類別
第二類
型號規(guī)格
NovoCyte D1040、NovoCyte D1041、NovoCyte D2040R、NovoCyte D2041R、NovoCyte D2060R、NovoCyte D2061R、NovoCyte D2110V、NovoCyte D2111V、NovoCyte D3080、NovoCyte D3081、NovoCyte D3130、NovoCyte D3131、NovoCyte D3000、NovoCyte D3001
結(jié)構(gòu)及組成/主要組成成分
產(chǎn)品由主機、電源適配器、儲液臺組成。
適用范圍/預(yù)期用途
產(chǎn)品適用于臨床使用中對單細胞或其他非生物顆粒膜表面以及內(nèi)部的生物化學及生物物理特性成分進行定量分析用。
（一）流式細胞儀的主要用途：
1、分析細胞表面標志。細胞表面的功能很復(fù)雜，是近年來分子細胞生物學研究的新域，細胞表面標志與免疫、癌變等都有著十分密切的關(guān)系。流式細胞儀的發(fā)明可以很好進行細胞表面標志的分析，起到非常重要的作用。
2、分析細胞內(nèi)抗原物質(zhì)。抗原是能刺激機體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細胞，并與這些產(chǎn)物發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。通過流式細胞儀對于細胞內(nèi)的抗原物質(zhì)進行分析可以很好地了解機體的免疫功能等。
3、分析細胞受體。細胞受體主要是同脂溶性的小信號分子相作用，流式細胞儀通過對細胞受體的分析可以幫助調(diào)節(jié)更多的基因表達。
4、分析腫瘤細胞的DNA、RNA含量。流式細胞儀通過對腫瘤細胞的DNA、RNA分析，可以判斷出病變程度，對于診斷和治療是非常有利的。
5、分析免疫細胞的功能。免疫細胞俗稱白細胞，包括淋巴細胞、吞噬細胞等，流式細胞儀通過對于人體內(nèi)的免疫細胞進行功能的分析，可以更好的判斷出各類細胞的功能，這對于幫助人體建立良好的免疫系統(tǒng)非常有幫助。
總結(jié)：流式細胞儀除了以上的主要用途之外，還被用于進行液體的活檢，包括ddPCR、NGS、CTC、還有ctDNA等。
（二）流式細胞儀的使用及注意事項
流式細胞儀在使用，甚至在使用過程中都要精心進行調(diào)試，以保證工作的可靠性和性。調(diào)試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
(1) 激光強度調(diào)節(jié)：除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外，還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為大。
(2) 液流速度調(diào)節(jié)：可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督，調(diào)節(jié) 氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
(3) 測量區(qū)光路調(diào)節(jié)：這是調(diào)試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交，而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
流式細胞術(shù)中所測得的量是相對值，因此需要在使用或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定，這樣才能通過相對測量獲得對的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調(diào)整和定量標度。標準樣品應(yīng)該穩(wěn)定，有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形，樣品分散性能良好，且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學標準樣品，雞血紅細胞做為生物學標準樣品。
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微球用樹脂材料制作，或標有熒光素，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑：雞血=1：4)，經(jīng)PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h，后經(jīng)PBS再清洗，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。
（三）流式細胞儀的操作和使用
(1) 打開電源，對系統(tǒng)進行預(yù)熱；
(2) 打開氣體閾，調(diào)節(jié) 壓力，獲得適宜的液流速度；開啟光源冷卻系統(tǒng)；
(3) 在樣品管中加入去離子水，沖洗液流的噴嘴系統(tǒng)；
(4) 利用校準標準樣品，調(diào)整儀器，使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上，0和90散射的熒光強度強，并要求變異系數(shù)為��；
(5) 選定流速、測量細胞數(shù)、測量參數(shù)等，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機屏上數(shù)據(jù)的顯示方式，從而能直觀掌握測量進程；
(6) 樣品測量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統(tǒng)；
(7) 因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機硬盤(有的機器還備有光盤系統(tǒng)，存貯量更大)，因此可關(guān)閉氣體、測量裝置，而單獨使用計算機進行數(shù)據(jù)處理；
(8) 將所需結(jié)果打印出來。
1.4.3 操作和使用中的注意事項
(1) 光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件，暴露的較強的光線下以后，需要較長時間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作；另外還要注意磁屏蔽；
(2) 光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常；
(3) 液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通，避免氣泡栓塞，所使用的鞘流液使用要經(jīng)過過濾、消毒；注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等；
(4) 特別強度每次測量都需要對照組
更新時間：2024/11/12 13:41:15
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